Централизованная бактериологическая лаборатория СПб ГБУЗ ГПТД
Централизованная бактериологическая лаборатория СПб ГБУЗ ГПТД оказывает медицинскую помощь по профилю «медицинская микробиология» жителям Санкт-Петербурга по направлениям врачей-фтизиатров противотуберкулезных диспансеров (отделений, кабинетов) и медицинских организаций общей сети. Задача бактериологической лаборатории противотуберкулезной службы – этиологическая (выявление возбудителя заболевания) диагностика туберкулеза.
В настоящее время в ЦБЛ проводят в год:
- около 7000 бактериоскопических исследований;
- более 60000 посевов проб диагностического материала на плотные питательные среды;
- около 12000 посевов на жидкую среду с использованием анализатора BACTEC MGIT 960;
- определение лекарственной чувствительности возбудителя туберкулеза методом абсолютных концентраций на ППС к противотуберкулезным препаратам: стрептомицин, изониазид, рифампицин, этамбутол, офлоксацин, канамицин, капреомицин, парааминосалициловая кислота, этионамид, циклосерин;
- определение лекарственной чувствительности на жидкой питательной среде методом пропорций к противотуберкулезным препаратам: изониазид, рифампицин, этамбутол, офлоксацин, левофлоксацин, моксифлоксацин, канамицин, капреомицин, парааминосалициловая кислота, этионамид, линезолид;
- более 3000 ПЦР-исследований в реальном времени по выявлению генетических маркеров (ДНК) МБТ в пробах от пациентов.
Количество исследований с использованием ускоренных методов диагностики планируется наращивать.
На протяжении десятилетий диагностика туберкулеза проводилась классическими методами – бактериоскопическим (световая с окраской по Цилю-Нильсену и люминесцентная с окраской аурамином-родамином) и бактериологическим (культуральным) с посевом материала от больных на плотные питательные среды Левенштейна-Йенсена и Финн II.
Традиционные методы микробиологической диагностики туберкулеза обладают рядом существенных недостатков. Бактериоскопия, наиболее быстрый и дешевый метод, характеризуется наименьшей чувствительностью и отсутствием возможности отличить возбудителя туберкулеза (МБТ) от нетуберкулезных микобактерий (НТМБ). А посев на плотные питательные среды (ППС), позволяющий установить не только наличие возбудителя туберкулеза в пробе диагностического материала и отличить его от других, похожих микроорганизмов, но и определить чувствительность МБТ к противотуберкулезным препаратам, характеризуется рекордной в бактериологии длительностью. Результат посева на плотные питательные среды можно получить в срок от одного до трех месяцев. Еще 3-4 недели необходимо для определения лекарственной чувствительности возбудителя.
В настоящее время, несмотря на устойчивое снижение заболеваемости туберкулезом в России, регистрируемое с 2000 года, ситуация по туберкулезу в стране оценивается как напряженная. В связи с этим, остро стоит вопрос быстрой этиологической диагностики туберкулеза. Ускоренные методы лабораторной диагностики значительно повышают вероятность эффективного лечения больных туберкулезом, особенно в случае наличия лекарственной устойчивости у возбудителя и сокращает сроки химиотерапии. Правильно организованный диагностический процесс и использование современных методов диагностики позволяет в минимальные сроки дать клиницисту информацию о подтверждении этиологии заболевания и помочь в выборе оптимальной тактики назначения противотуберкулезных препаратов.
С 2006 г. международным сообществом в качестве стандартного эталона для подтверждения этиологии туберкулеза был одобрен метод посева на жидкую питательную среду с быстрой идентификацией возбудителя. Культивирование на жидкой среде повышает выявление МБТ примерно на 10% по сравнению с плотными питательными средами. При этом, время проведения анализа сокращается до 1-6 недель, а определение лекарственной чувствительности – до 12-14 дней. Для культивирования посевов на жидкой среде используют автоматизированную систему BACTEC MGIT 960.
Бактериологическая лаборатория СПб ГБУЗ ГПТД впервые была оснащена анализатором BACTEC MGIT 960 в 2011 году. В настоящее время лаборатория располагает тремя приборами.
Учитывая высокую вероятность быстрого прогрессирования туберкулеза без адекватной терапии у больных ВИЧ-инфекцией, для них наиболее важно использование ускоренных методов диагностики. Для больных ВИЧ-инфекцией, в отличие от других категорий пациентов, при диагностике туберкулеза актуальным является исследование крови. В нашей лаборатории для посева крови на жидкую среду использую анализатор BACTEC FX.
Наиболее быстрым в настоящее время методом этиологической диагностики является молекулярно-генетический (полимеразная цепная реакция – ПЦР).
ПЦР позволяет обнаружить генетические маркеры МБТ (специфические фрагменты ДНК) в диагностическом материале и установить наличие маркеров устойчивости к наиболее значимым противотуберкулезным препаратам (изониазиду, рифампицину, фторхинолонам) за 2-3 рабочих дня. Этот метод диагностики внедрен в работу лаборатории с 2014 года.
В настоящее время в ЦБЛ используют два варианта молекулярно-генетического метода – ПЦР в реальном времени (определение ДНК МБТ в материале от больных) и ПЦР с гибридизацией (определение ДНК МБТ в культурах микобактерий, дифференциация туберкулезных и нетуберкулезных микобактерий с определением видовой принадлежности НТМБ.
Централизованная бактериологическая лаборатория принимает диагностический материал от всех противотуберкулезных учреждений Санкт-Петербурга, а также от ЛПУ иного профиля при подозрении на туберкулез.
- Бесплатно по заказам других медицинских организаций,в соответствии с порядками маршрутизации.
- Бесплатно гражданам, получающих лечение в дневных и круглосуточных стационарах СПб ГБУЗ ГПТД.
- Бесплатно гражданам, находящихся под диспансерным наблюдением в СПб ГБУЗ ГПТД.
- Бесплатно гражданам, находящимся в контакте с источником туберкулеза, при проведении первичных противоэпидемических мероприятий в очаге туберкулеза.
- Платные услуги проводятся при самообращении, в том числе без направления врача.
Забор диагностического материала для проведения лабораторных исследований выполняется во всех подразделениях в соответствии с графиками работы процедурных кабинетов.
Расписание работы процедурных кабинетов в СПб ГБУЗ ГПТД
Правила подготовки к забору биоматериала (кровь, моча, мокрота)
➤ Адрес: Старо-Петергофский проспект, 8.
◴ Режим работы: ежедневно с 08:00 до 18:00, кроме выходных и праздничных дней.
𖡡 Построить маршрут до отделения на Яндекс-картах
☎ Телефон: 251-60-05 (по будням с 8:00 до 18:00)
♚ Заведующий лабораторией: Хмелева Ольга Андреевна
♛ Медицинская сестра: Барбакадзе Ольга Михайловна
☏ Подразделение не ведет прием граждан, заведующий отделением не ведет административный прием
✿ Фотогалерея
Историческая справка
Бактериологическая лаборатория в ГПТД была организована в конце 1960-х годов. Основателями стали бактериолог, заведующая лабораторией Валентина Антоновна Добрега и главный врач диспансера Иван Акимович Якимчук.
В первой трети XIX века на участках нынешних домов 8-б,10 и 12 по Старо-Петергофскому проспекту находилась усадьба Федора Антоновича Энгельгардта, бригадира, героя штурма Измаила. Судя по плану Шуберта (1828), дом 8 и находящийся перед ним сквер повторяют композицию усадебного дома и усадебного сада Энгельгардта, сложившуюся в самом начале XIX века, а возможно и ранее.
Микроскопия диагностического материала
Диагностическая чувствительность метода микроскопии обычно составляет не более 50% среди всех впервые выявленных больных туберкулезом легких.
Методы микроскопии не позволяют дифференцировать МБТ от нетуберкулезных микобактерий и имеют невысокую чувствительность, требующую наличия, по крайней мере, 5 000-10 000 бактериальных клеток в миллилитре мокроты.
Методы микроскопии, обладающие относительно невысокой чувствительностью, сохраняют, тем не менее, свою актуальность, так как доступны, не требуют сложного аналитического лабораторного оборудования, позволяют быстро выявлять наиболее эпидемически опасных больных туберкулезом и оценивать массивность бактериовыделения.
Культивирование диагностического материала
Культуральные методы диагностики (методы выращивания МБТ путем посева диагностического материала на питательные среды с последующей идентификацией выросших микроорганизмов) являются основными методами выделения МВТ. Их специфичность превышает специфичность микроскопических методов, а предел обнаружения значительно выше: наличие нескольких сотен и даже десятков жизнеспособных микобактерий (МБ) в 1 мл исследуемого материала.
При культивировании МВТ используют разные по составу питательные среды, дающие разные возможности роста МБТ. Культивирование микроорганизмов обеспечивает точную диагностику туберкулеза, значительно увеличивая число случаев выявления возбудителя и позволяя подтвердить достоверность поставленного диагноза «туберкулез».
Диагностическая чувствительность методов культивирования МБТ достигает 70-80 % среди впервые выявленных больных туберкулезом легких.
Среди впервые выявленных больных туберкулезом легких с бактериовыделением с помощью методов культивирования МБТ удается выявить на 10-30% больше числа случаев заболевания по сравнению с методами микроскопии. Методы культивирования МБТ позволяют выделить культуру возбудителя, необходимую для определения его видовой принадлежности и определения спектра и степени лекарственной чувствительности.
Видовая идентификация выделенной культуры микроорганизмов с помощью комплекса современных молекулярных методов позволяет сразу же дифференцировать МБТ от НТМБ и неспецифической микрофлоры.
Медленный рост МБТ требует значительного времени ожидания результатов при данных видах исследований. В среднем, при посеве диагностического материала от впервые выявленных больных для получения роста МБТ на плотных питательных средах требуется 21-36 дней, на жидких питательных средах — 12-22 дня.
Определение лекарственной чувствительности микобактерий
Для определения лекарственной чувствительности МБТ в качестве основных рекомендуется использовать непрямые фенотипические методы исследований, т.е. исследование культуры МБТ в присутствии противотуберкулезных препаратов.
Генотипические методы определения лекарственной чувствительности/устойчивости МБТ основаны на изучении специфических участков генома МБТ и выявлении наличия или отсутствия определенных мутаций в генах, связанных с резистентностью к конкретным ПТП. При этом исследованию могут подвергаться как диагностический материал, так и выросшие культуры микроорганизмов.
Основным достоинством молекулярно-генетических методов (МГМ) является быстрое и достоверное выявление больных МЛУ ТБ, так как они позволяют выявить ЛУ МБТ к рифампицину и изониазиду, а также к важнейшим препаратам второго ряда, позволяя использовать разделение потоков больных и включать в режим лечения наиболее эффективные препараты.
Использование МГМ для определения ЛУ является первоначальным этапом обследования больных и не исключает применение традиционных культуральных методов определения ЛЧ возбудителя, т.к. молекулярно-генетические тест-системы определения ЛУ в настоящее время разработаны не для всех ПТП и диагностическая чувствительность их в некоторых случаях недостаточная для назначения корректного режима лечения.
Молекулярно-генетические методы
Преимущество исследований на основе молекулярно-генетических методов в том, что они являются «быстрыми» методами, позволяющими получить результаты в относительно короткий временной период. Заключение о наличии МБТ в диагностическом материале делается на основании выявления видоспецифичного генетического маркера (ДНК) МБТ или видоспецифичных белков-антигенов, а вывод о лекарственной устойчивости (ЛУ) — на основании выявления мутаций в целевых участках генов МБТ, ассоциированных с ЛУ. Методы видовой идентификации, основанные на выявлении генетических маркеров МБТ с помощью ПЦР, имеют преимущество в специфичности и быстроте анализа по сравнению с культуральными и биохимическими методами. Получение положительного результата обнаружения маркера ДНК МБТ методом ПЦР возможно в течение 1 рабочего дня с момента поступления диагностического материала в лабораторию.
